Статья «КОНФОРМАЦИОННЫЙ “ПОРТРЕТ” АНГИОТЕНЗИНПРЕВРАЩАЮЩЕГО ФЕРМЕНТА, "Биоорганическая химия"»

Ангиотензинпревращающий фермент (АПФ) - широко распространенная в организме цинк-зависимая металлопротеиназа, которая метаболизирует многие пептиды и играет ключевую роль в регуляции кровяного давления и ремоделировании сосудов. Этот фермент экспрессируется как гликопротеин, мембранный белок 1-го типа на поверхности эндотелиальных и эпителиальных клеток, но также функционирует в виде растворимой формы в биологических жидкостях. В исследовании использованы очищенный АПФ из легких, который в основном продуцируется эндотелиальными клетками капилляров легких, АПФ из сердца, продуцируемый эндотелиальными клетками сердца и, возможно, миофибробластами, и АПФ из семенной жидкости, продуцируемый эпителиальными клетками предстательной железы и эпидидимисом. Диаграммы, иллюстрирующие эффективность связывания набора из 17 моноклональных антител (мАт), направленных к различным конформационным эпитопам на поверхности двух доменов АПФ человека, значительно различались для АПФ, выделенных из разных органов. Такая диаграмма (конформационный “портрет” АПФ) отражает локальную конформацию поверхности определенного АПФ. Различия конформационных “портретов” АПФ, экспрессированных клетками разных типов или даже схожими клетками, но в разных органах, можно объяснить посттрансляционной модификацией белка АПФ в этих органах, и в первую очередь разным гликозилированием сайтов N-гликозилирования Asn в положениях 25, 117, 289, 666, 685 и 731. Масс-спектрометрия трипсиновых гидролизатов АПФ, выделенных из разных органов человека, позволила выявить в составе различных АПФ сайты N-гликозилирования, действительно содержащие гликаны: остатки Asn в положениях 82, 117, 416, 648, 666, 685 и 731 в составе АПФ из семенной жидкости, Asn117, 648, 666 и685 в составе АПФ из легких, а также Asn117, 480, 666 и 685 в составе АПФ из сердца. Продемонстрированы различия в вероятных структурах гликанов в составе АПФ, в частности, в сайте N-гликозилирования Asn666, объясняющие разницу в эффективности связывания мАт с АПФ из разных органов.