Войти / Регистрация
Корзина

  • Ваша корзина пуста
Войти / Регистрация
Корзина

  • Ваша корзина пуста

Статья «Повышение эффективности реакции трансгликозилирования, катализируемой альфа-галактозидазой из Thermotoga maritima, методами белковой инженерии, "Биохимия"»

Авторы:
  • Бобров К.С.1
  • Борисова А.С.2
  • Энейская Е.В.3
  • Иванен Д.Р.4
  • Шабалин К.А.5
  • Кульминская А.А.6
  • Рычков Г.Н.7
стр. 1422-1435
Платно
1 Петербургский институт ядерной физики, 2 Петербургский институт ядерной физики, 3 Петербургский институт ядерной физики, 4 Петербургский институт ядерной физики, 5 Петербургский институт ядерной физики, 6 Петербургский институт ядерной физики, 7 Петербургский институт ядерной физики
  • В выпуске: №10, 2013, Том 78
  • В журнале: Биохимия
  • Издательство: ФГУП «Издательство «Наука»
  • Рубрика ГРНТИ: Химия. Биология. Медицина.
  • Год выхода: 2013
  • SDI: 007.001.0320-9725.2013.000.010.1422.1435
  • ISSN: 0320-9725
Ключевые слова:
  • transglycosylation
  • трансгликозилирование
  • ?-d-Galactosidase
  • enzymatic synthesis of pNP galactobiosides
  • ?-D-галактозидаза
  • ферментативный синтез pNP дигалактозидов
Аннотация:
При высоких концентрациях субстрата гидролиз паранитрофенил ?- D- галактопиранозида ( p NPGal) ?- D - галактозидазой из Thermotoga maritima ( TmГалА ) сопровождается трансгликозилированием с образованием смеси (?1,2)-, (?1,3)- и (?1,6)- паранитрофенил ( p NP) дигалактозидов. Молекулярное моделирование стадии реакции, предшествующей синтезу p NP дигалактозидов в активном центре фермента, привело к обнаружению аминокислотных остатков, модификация которых потенциально может увеличить эффективность реакции трансгликозилирования. После сайт-направленного мутагенеза предсказанного набора замен аминокислотных остатков гены фермента дикого типа и мутантных форм TmГалА были экспрессированы в клетках E. coli, а соответствующие ферменты выделены и проверены в синтезе различных p NP дигалактозидов. Было показано, что у трех мутантов, F328A, P402D и G385L, заметно увеличилась общая трансгликозилирующая активность по сравнению с ферментом дикого типа. Кроме того, мутант F328A оказался способным к образованию региоизомера со связью (?1,2)- с выходом в 16 раз большим по сравнению с TmГалА дикого типа.

Архивные статьи (2015 год и ранее) доступны для ознакомления бесплатно, для скачивания их необходимо приобрести. Для просмотра материалов необходимо зарегистрироваться и авторизоваться на сайте.

Чтобы приобрести доступ к материалу для юридического лица, пожалуйста, свяжитесь с администрацией портала с помощью формы обратной связи либо по электронному адресу libnauka@naukaran.com.  

Действия с материалами доступны только авторизованным пользователям.  

 

* - цена актуальна только для физических лиц
В т.ч. НДС 20%