Статья «РОЛЬ ПРОТЕИНКИНАЗ р38 И CK2 В ОТВЕТАХ МАКРОФАГАЛЬНЫХ КЛЕТОК RAW 264.7 НА ЛИПОПОЛИСАХАРИД, "Биохимия"»

Исследовали роль протеинкиназ p38 и CK2 (казеинкиназа 2) в формировании ответов макрофагальных клеток линии RAW 264.7 на липополисахарид (LPS) из грамотрицательных бактерий. С использованием специфических блокаторов активности p38 (p38 MAP kinase Inhibitor XI) и CK2 (Casein Kinase II Inhibitor III) изучали влияние этих протеинкиназ на LPS-вызванную активацию сигнальных путей ядерного фактора kB (NF-kB), стресс-активируемых протеинкиназ/c-Jun N-концевых киназ (SAPK/JNK), p38 и регуляторного фактора интерферона (IRF)3, продукцию толл-подобного рецептора 4 (TLR4), индуцибельных белков теплового шока HSP72 и HSP90, интерлейкинов (IL) IL-1a, IL-1Q, IL-6, фактора некроза опухолей (TNF) ? и IL-10. Активацию проапоптозной системы в макрофагальных клетках оценивали по соотношению активированной и неактивированной форм каспазы-3 и фосфорилированию p53. Показали, что через 6 ч после добавления LPS (2,5 мкг/мл) к клеткам RAW 264.7 происходит активация ^Ю-сигнальных путей, что сопровождается достоверным повышением фосфорилирования киназы IkB (IKK) ?/?, NF-kB (как по Ser536, так и по Ser276), p38, JNK и IRF3. При этом наблюдали увеличение содержания белка TLR4, индуцибельных форм белков теплового шока, про- и противовоспалительных цитокинов и незначительную активацию про-апоптозной системы клетки. С помощью ингибиторного анализа показали, что при ранних ответах макрофагальных клеток на LPS как казеинкиназа 2, так и p38 регулируют активацию сигнальных путей митоген-активируемых протеинкиназ/NF-KB, фосфорилирование p65 по Ser276/Ser536, вызывают накопление белков теплового шока HSP70, HSP90 и LPS-распознающего рецептора TLR4. Кроме того, снижение активности этих протеинкиназ при использовании p38 MAP kinase Inhibitor XI и Casein Kinase II Inhibitor III вызывает дисбаланс эффекторной функции макрофагов, проявляющийся в снижении продукции провоспали-тельных цитокинов раннего ответа, а также в несогласованности работы про- и противоапоптозных сигнальных путей, что может привести к апоптозу клеток. Обнаруженные нами эффекты свидетельствуют о неэффективности терапевтического использования ингибиторов p38 и CK2 на ранних стадиях воспалительной реакции.