Войти / Регистрация
Корзина

  • Ваша корзина пуста
Войти / Регистрация
Корзина

  • Ваша корзина пуста

Статья «Параллельное выявление новосинтезированной РНК и ядерных белков на ультраструктурном уровне: модификация протокола для иммуноэлектронной микроскопии, "Цитология"»

Авторы:
  • Боголюбова И. О.1
  • Боголюбов Д. С.2
стр. 463-468
Платно
1 Институт цитологии РАН; Восточно-Европейский институт психоанализа, 2 Институт цитологии РАН
  • В выпуске: №6, 2018, Том 60
  • В журнале: Цитология
  • Издательство: ФГУП «Издательство «Наука»
  • Рубрика ГРНТИ: Биологические науки
  • Год выхода: 2018
Ключевые слова:
  • иммуноэлектронная микроскопия
  • двойное иммуномечение
  • Br-УТФ
  • эмбрионы мыши
  • immunoelectron microscopy
  • double labeling
  • BrUTP
  • mouse embryos
Аннотация:
В настоящей работе мы представляем новую модификацию протокола, позволяющего одновременно выявлять на ультраструктурном уровне новосинтезированную РНК и репрезентативные ядерные белки с помощью иммуноэлектронной микроскопии. В качестве тест-системы использованы ранние эмбрионы мыши, инъецированные Br-УТФ. В данном случае стандартная методика обработки ультратонких срезов смесью соответствующих первичных антител дает неудовлетворительные результаты, по-видимому из-за несоответствия блокирующих буферных растворов и разбавителей. Мы использовали новый вариант методики, состоящий из двух этапов - полного цикла обработки срезов на сетках антителами к определенному ядерному белку и полного цикла обработки этих же срезов антителами, распознающими Br-УТФ. В промежутке между этапами срезы высушиваются, тем самым исключается смешивание буферных растворов, используемых в первом и втором циклах иммуномечения. Мы демонстрируем результативность данного протокола и специфичность наблюдаемого иммуномечения на примерах одновременного выявления новосинтезированных РНК, а также белка ATRX и одной из функциональных модификаций гистонов Н4К5ас.

Архивные статьи (2015 год и ранее) доступны для ознакомления бесплатно, для скачивания их необходимо приобрести. Для просмотра материалов необходимо зарегистрироваться и авторизоваться на сайте.

Чтобы приобрести доступ к материалу для юридического лица, пожалуйста, свяжитесь с администрацией портала с помощью формы обратной связи либо по электронному адресу libnauka@naukaran.com.  

Действия с материалами доступны только авторизованным пользователям.