Статья «РЕАКЦИИ ОКИСЛЕНИЯ НАДН ТЕТРАЗОЛИЕМ И УБИХИНОНОМ, КАТАЛИЗИРУЕМЫЕ ДРОЖЖЕВОЙ АЛКОГОЛЬДЕГИДРОГЕНАЗОЙ, "Прикладная биохимия и микробиология"»

Изучены процессы окисления НАДН в водных и водно-спиртовых буферных растворах пара-нитротетразолием фиолетовым и убихононом, катализируемые изолированной дрожжевой алкогольдегид- рогеназой. В водном растворе при рН 6-7 в присутствии пара-нитротетразолия реакция окисления НАДН протекала чрезвычайно медленно вследствие ингибирования фермента остающимся на нём гидрофобным продуктом, формазаном, образующимся при восстановлении пара-нитротетразолия. Однако при подщелачивании среды до рН 8-9 или добавлении спирта (этанола или изопропанола) формазан десорбировался с фермента, вследствие чего НАДН окислялся с достаточной скоростью. Предполагается, что эта редуктазная реакция может быть использована в качестве удобного колориметрического метода измерения активности семейства различных алкогольдегидрогеназ. Во всём диапазоне рН не наблюдалось восстановления тетразолия спиртом. Реакция окисления НАДН в присутствии фермента и убихонона также протекала довольно медленно даже при добавлении спирта, но активировалась при подкислении среды до рН 5.5-6.0. При замене трис-фосфатного буфера на HEPES был обнаружен квази-колебательный режим: окисление НАДН убихиноном до НАД+ с последующим его обратным восстановлением спиртом до НАДН.