Войти / Регистрация
Корзина

  • Ваша корзина пуста
Войти / Регистрация
Корзина

  • Ваша корзина пуста

Статья «АНАЛИЗ ИНТРОН-СОДЕРЖАЩИХ ПРЕ-мРНК И СПЛАЙСИРОВАННЫХ мРНК В ХЛОРОПЛАСТАХ КУКУРУЗЫ ПОСРЕДСТВОМ ОТ-ПЦР, "Молекулярная биология"»

Авторы:
  • Лысенко Е.А.1
  • Клаус А.А.2
  • Кузнецов В. В.3
стр. 124-
Платно
1 Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова. Химический факультет, 2 Институт физиологии растений им. К.А. Тимирязева Российской академии наук, Москва, 127276, 3 чл.-корр. РАН
Аннотация:
Для анализа сплайсинга хлоропластных РНК обычно используют дорогостоящие и трудоемкие методы ? такие, как нозерн-блот гибридизация, защита от РНКаз или удлинение праймеров. Применение более доступного метода ОТ-ПЦР может приводить к не полному выявлению несплайсированных пре-РНК. Мы изучили, какие факторы этого метода могут способствовать наблюдаемому снижению доли интрон-содержащих транскриптов относительно зрелых РНК на примере пяти белок-кодирующих генов хлоропластов кукурузы. Оказалось, что для адекватного выявления доли несплайсированных форм РНК необходимо учитывать способы инактивации ДНКазы, температуру синтеза кДНК и качество используемой ДНК-полимеразы. В случае одного из генов наблюдали уменьшение доли интрон-содержащих транскриптов по мере увеличения числа циклов ПЦР. Показано, что после ПЦР нити ампликонов, содержащие и не содержащие последовательность интрона, могут образовывать гетеродуплексы. Предложена простая и эффективная методика анализа как сплайсированных мРНК, так и интрон-содержащих пре-мРНК в хлоропластах.

Архивные статьи (2015 год и ранее) доступны для ознакомления бесплатно, для скачивания их необходимо приобрести. Для просмотра материалов необходимо зарегистрироваться и авторизоваться на сайте.

Чтобы приобрести доступ к материалу для юридического лица, пожалуйста, свяжитесь с администрацией портала с помощью формы обратной связи либо по электронному адресу libnauka@naukaran.com.  

Действия с материалами доступны только авторизованным пользователям.