Статья «МЕТОД ПАРАЛЛЕЛЬНОГО И ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОГО ГЕНЕРИРОВАНИЯ ОДНОДОМЕННЫХ АНТИТЕЛ ДЛЯ ПРОТЕОМНОГО АНАЛИЗА ПЛАЗМЫ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА, "Молекулярная биология"»

Описан новый эффективный метод параллельного и последовательного поэтапного генерирования однодоменных антител к различным богато представленным белкам сложного протеома на примере плазмы крови человека. Однодоменные антитела обладают рядом особенностей, выгодно отличающих их от классических антител: они способны узнавать необычные уникальные конформационные эпитопы нативных белков-мишеней, имеют малый размер, их относительно легко наработать и модифицировать, они обладают повышенной стабильностью и быстро ренатурируют после денатурации, и, как следствие, содержащие их иммуносорбенты могут быть многократно использованы без заметной потери активности. Принципиальная новизна и универсальность описанного метода в том, что он позволяет генерировать антитела последовательно к ряду мажорных антигенов сложной белковой смеси даже при отсутствии очищенных антигенов. Эффективность метода продемонстрирована на примере генерирования однодоменных антител к ряду самых мажорных белков плазмы крови человека. Полученные антитела рассматриваются как перспективные биотехнологические инструменты, которые могут быть использованы для разработки прототипов новых диагностических и терапевтических средств, а также соответствующих методов, базирующихся на иммуноаффинном удалении, обогащении, анализе и/или таргетировании заданных белков и их комплексов из крови человека. Продемонстрировано, что один из перспективных путей использования получаемых однодоменных антител - создание на их основе новых иммуносорбентов. Коммерчески доступные аналогичные иммуносорбенты на основе классических антител, как правило, удаляют из плазмы крови сразу многие мажорные белки, а иммуносорбенты для многих индивидуальных белков труднодоступны и довольно дороги. Совокупность получаемых нами однодоменных антител - это уникальный набор новых материалов, позволяющий разрабатывать более эффективные и деликатные подходы для предобработки плазмы крови и анализа в ней различных биомаркеров.