Войти / Регистрация
Корзина

  • Ваша корзина пуста
Войти / Регистрация
Корзина

  • Ваша корзина пуста

Статья «КИНЕТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ УЗНАВАНИЯ ПОВРЕЖДЕННЫХ НУКЛЕОТИДОВ МУТАНТНЫМИ ФОРМАМИ 8-ОКСОГУАНИН-ДНК-ГЛИКОЗИЛАЗЫ HOGG1, "БИООРГАНИЧЕСКАЯ ХИМИЯ"»

Авторы:
  • ЛУКИНА М.В. 1
  • КУЗНЕЦОВА А.А. 2
  • КУЗНЕЦОВ Н.А.
  • ФЕДОРОВА О.С.
стр. 4-17
Платно
1 Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН, 630090, Новосибирск, просп. Акад. Лаврентьева, 8; Новосибирский государственный университет, 630090, Новосибирск, ул. Пирогова, 2, 2 Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН, 630090, Новосибирск, просп. Акад. Лаврентьева, 8; Новосибирский государственный университет, 630090, Новосибирск, ул. Пирогова, 2
Аннотация:
Исследована роль аминокислотных остатков Tyr-203, His-270 и Lys-249 активного центра 8-оксогуанин-ДНК-гликозилазы (hOGG1) в процессах узнавания поврежденного нуклеотида 7,8-дигидро-8-оксогуанозина (oxoG) и в каталитических стадиях ферментативной реакции. Предстационарный кинетический анализ конформационных переходов мутантных форм фермента и модельных ДНК-субстратов в ходе ферментативного процесса показал, что данные аминокислотные остатки принимают участие в процессе специфического связывания ДНК-субстратов: остаток Tyr-203 ответственен за узнавание поврежденного нуклеотида; взаимодействие остатка His-270 с ДНК абсолютно необходимо для формирования каталитически активного комплекса с oxoG-содержащей ДНК; Lys-249 выступает не только в качестве одной из каталитических аминокислот активного центра фермента, но и играет важную роль в процессе образования специфического фермент-субстратного комплекса. Проведенное исследование существенно дополняет молекулярно-кинетическую модель механизма ферментативной реакции и способствует выяснению природы высокой специфичности hOGG1 по отношению к окисленным основаниям в ДНК. 7,8-Dihydro-8-oxoguanine (oxoGua) is one of the main products, generated at the oxidation of DNA. In human cells the oxoGua is removed from DNA under action of 8-oxoguanine-DNA-glycosylase hOGG1. This enzyme catalyzes the reaction of N-glycosidic bond hydrolysis with the formation of apurinic/apyrimidinic site (AP-site) and the following reaction of 3?-phosphate ?-elimination. The present work is devoted to clarifying the role of amino acid residues of the enzyme active site Tyr-203, His-270 and Lys-249 in damaged nucleotide recognition processes and in catalytic stages of enzymatic reactions. Pre-steady state kinetic analysis of conformational transitions of the enzyme mutant forms and the model DNA-substrates during enzymatic process showed that these amino acid residues are involved in the process of a specific binding of DNA-substrates. The residue Tyr-203 is responsible for recognition of damaged nucleotide. The interaction of His-270 with DNA is absolutely necessary for the formation of a catalytically active complex with oxoGua-containing DNA. Lys-249 acts not only as one of the catalytic amino acids of the enzyme active site, but also plays an important role in the formation of a specific enzyme-substrate complex. The study specifies the molecular-kinetic model of enzymatic reaction mechanism and helps to clarify the nature of hOGG1 high specificity towards oxidized bases in DNA. Keywords: human 8-oxoguanine-DNA-glycosylase, specificity, conformational changes, mechanism of recognition, pre-steady state kinetics

Архивные статьи (2015 год и ранее) доступны для ознакомления бесплатно, для скачивания их необходимо приобрести. Для просмотра материалов необходимо зарегистрироваться и авторизоваться на сайте.

Чтобы приобрести доступ к материалу для юридического лица, пожалуйста, свяжитесь с администрацией портала с помощью формы обратной связи либо по электронному адресу libnauka@naukaran.com.  

Действия с материалами доступны только авторизованным пользователям.