Войти / Регистрация
Корзина

  • Ваша корзина пуста
Войти / Регистрация
Корзина

  • Ваша корзина пуста

Статья «ПОЛУЧЕНИЕ ПРООНКОГЕННЫХ МУТАНТНЫХ ФОРМ V659E И V659Q ТРАНСМЕМБРАННОГО ДОМЕНА РЕЦЕПТОРНОЙ ТИРОЗИНКИНАЗЫ ErbB2 ДЛЯ СТРУКТУРНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ, "Биологические мембраны: Журнал мембранной и клеточной биологии"»

Авторы:
  • Бочарова О.В.1
  • Бочаров Э.В.2
  • Минеев К.C.3
  • Дубинный М.А.4
  • Мишин А.В.5
  • Арсеньев А.С.6
стр. 83-
Платно
1 Южный научный центр РАН, 2 ФГБУН Институт биоорганической химии имени академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, 117997, Москва, ул. Миклухо-Маклая, 16/10, 3 Институт биоорганической химии им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, 117997, Москва, ул. Миклухо-Маклая, 16/10, 4 Институт биоорганической химии им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, 117997, Москва, ул. Миклухо-Маклая, 16/10, 5 Институт океанологии РАН – ИО РАН, Москва, 6 ФГБУН Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, 117997, Москва, ул. Миклухо-Маклая, 16/10
Аннотация:
Рецепторные тирозинкиназы ? интегральные мембранные белки, которые активируются при латеральной гомо- или гетеродимеризации, осуществляемой с участием их трансмембранного домена. Рецепторные тирозинкиназы играют важную роль в передаче межклеточного сигнала, а полиморфизм и мутации в их трансмембранных доменах ассоциированы с рядом заболеваний человека. Семейство рецепторов эпидермального фактора роста, ErbB, представляет собой важный класс рецепторных тирозинкиназ, которые участвуют в процессах роста, развития и дифференцировки клеток человека. В настоящей работе для изучения влияния патогенных мутаций на структурно-динамические свойства и специфическое взаимодействие трансмембранных доменов рецепторов семейства ErbB созданы высокоэффективные системы бактериальной экспрессии и очистки рекомбинантных трансмембранных фрагментов ErbB2641-684 с проонкогенными заменами остатка Val659 на остатки Glu или Gln. Трансмембранные фрагменты нарабатывали в клетках Escherichia coli BL21(DE3)pLysS в составе гибрида с тиоредоксином А. Протокол выделения и очистки включает металлохелатную аффинную и катионообменную хроматографии. Использование тромбина для гидролиза гибридного белка позволяет снизить финансовые затраты по сравнению с аналогичными протоколами. Описанные методики позволяют получить миллиграммовые количества мутантных трансмембранных фрагментов ErbB, а также их изотопно-меченых производных для структурных исследований методом гетероядерной спектроскопии ЯМР высокого разрешения в мембраноподобном окружении.

Архивные статьи (2015 год и ранее) доступны для ознакомления бесплатно, для скачивания их необходимо приобрести. Для просмотра материалов необходимо зарегистрироваться и авторизоваться на сайте.

Чтобы приобрести доступ к материалу для юридического лица, пожалуйста, свяжитесь с администрацией портала с помощью формы обратной связи либо по электронному адресу libnauka@naukaran.com.  

Действия с материалами доступны только авторизованным пользователям.