Войти / Регистрация
Корзина

  • Ваша корзина пуста
Войти / Регистрация
Корзина

  • Ваша корзина пуста

Статья «РЕПОРТЕРЫ ФЕРМЕНТ-СУБСТРАТ ДЛЯ ОЦЕНКИ СУБСТРАТНОЙ СПЕЦИФИЧНОСТИ ИЗОФОРМ HIF-ПРОЛИЛГИДРОКСИЛАЗЫ, "Биохимия"»

Авторы:
  • Осипьянц А.И.1
  • Смирнова Н.А.2
  • Христиченко А.Ю.3
  • Хушпульян Д.М.4
  • Никулин С.В.5
  • Чубарь Т.А.6
  • Захарянц А.А.7
  • Тишков В.И.8
  • Газарян И.Г.9
  • Полозников А.А.10
стр. 78-86
Платно
1 ФГБУ «НМИЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева» Минздрава России, 2 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт геохимии имени А.П. Виноградова Сибирского отделения Российской академии наук, Иркутск, 3 ФГБУ «НМИЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева» Минздрава России, 4 ФГБУ «НМИЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева» Минздрава России, 5 ФГБУ «НМИЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева» Минздрава России, 6 Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова, 7 ООО «Инновации и высокие технологии МГУ», 8 Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова; ООО «Инновации и высокие технологии МГУ», 9 ФГБУ «НМИЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева» Минздрава России; Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова, 10 ФГБУ «НМИЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева» Минздрава России
  • В выпуске: №1, 2018, Том 83
  • В журнале: Биохимия
  • Издательство: ФГУП «Издательство «Наука»
  • Рубрика ГРНТИ: Химия. Биология. Медицина.
  • Год выхода: 2018
  • SDI: 007.001.0320-9725.2018.083.001.7
  • УДК: 577.156;577.151.64
Ключевые слова:
  • активация
  • гибридный белок люциферазы
  • ингибиторы фермента
  • разветвленные оксихинолины
  • циклопирокс
  • ПЦР в реальном времени
  • activation
  • luciferase fusion protein
  • enzyme inhibitors
  • branched oxyquinolines
  • ciclopirox
  • real-time PCR
Аннотация:
Естественный ответ организма на гипоксию осуществляется за счет стабилизации фактора, индуцируемого гипоксией (HIF). Известны три изоформы субъединицы HIFa, стабильность которых регулируется тремя изоферментами HIF-пролилгидроксилазы (PHD1-3). Несмотря на интенсивные исследования субстратной специфичности с помощью измерения активности рекомбинантных изоформ фермента по отношению к трем изоформам HIF, не удается однозначно ответить на вопрос о предпочтительном субстрате для каждой изоформы фермента. В данной работе предлагается новый подход к решению проблемы субстратной специфичности, основанный на использовании клеточных репортеров, экспрессирующих пару, содержащую фермент и меченый люциферазой субстрат с одного вектора. Клетка в данном случае используется как биореактор для проведения и мониторинга реакции между оверэкспрессируемыми ферментом и субстратом. С помощью нового подхода удалось продемонстрировать, что HIF3 не является субстратом изоформы PHD3, что косвенно указывает на гидроксилирование второго пролина в последовательности 564PYIP567 (HIF1) под действием этой изоформы. Использование «парных» репортеров фермент-субстрат для оценки ингибиторного действия разветвленных оксихинолиновых ингибиторов HIF-пролилгидроксилазы позволяет с большей точностью выявить структурный мотив, оптимальный для ингибирования отдельных изо-форм фермента.

Архивные статьи (2015 год и ранее) доступны для ознакомления бесплатно, для скачивания их необходимо приобрести. Для просмотра материалов необходимо зарегистрироваться и авторизоваться на сайте.

Чтобы приобрести доступ к материалу для юридического лица, пожалуйста, свяжитесь с администрацией портала с помощью формы обратной связи либо по электронному адресу libnauka@naukaran.com.  

Действия с материалами доступны только авторизованным пользователям.