Статья «НАНОСТРУКТУРЫ НА ОСНОВЕ КВАНТОВЫХ ТОЧЕК ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В ПЕРСПЕКТИВНЫХ МЕТОДАХ ОДНО-И МНОГОФОТОННОЙ ВИЗУАЛИЗАЦИИ И ДИАГНОСТИКИ, "Оптика и спектроскопия"»

Молекулы, распознающие биомаркеры заболеваний (моноклональные антитела, моноАТ), зачастую оказываются слишком большими для биомедицинских приложений, а условия, используемые для их связывания с нанометками, приводят к неупорядоченной ориентации моноАТ относительно поверхности наночастицы. Сверхмалые нанозонды, сконструированные путем ориентированной конъюгации квантовых точек (КТ) с однодоменными антителами (одАТ), полученными из иммуноглобулина ламы и наработанными в культуре E. coli, имеют гидродинамический диаметр менее 12 нм и содержат одинаково ориентированные молекулы одАТ на поверхности каждой КТ. Такие нанозонды показывают превосходные специфичность и чувствительность при количественном определении малого количества клеток, экспрессирующих биомаркеры, а более высокий коэффициент диффузии одАТ делает возможным иммуногистохимический анализ в толще ткани, куда не проникают обычные моноАТ. Для обеспечения высокого качества иммунофлуоресцентной диагностики требуется высокая специфичность мечения и четкие различия между флуоресценцией нано-зондов и аутофлуоресценцией тканей. Многофотонная микроскопия с возбуждением в ближней ИК области спектра, удаленной от области возбуждения аутофлуоресценции тканей, позволяет решить эту проблему, а также визуализировать глубокие слои биологических тканей. Сечения двухфо-тонного поглощения света квантовыми точками состава CdSe/ZnS, конъюгированных с одАТ, на порядки величины превышают эти величины для органических флюорофоров. Такие нанозонды обеспечивают четкое различение областей опухолевой и нормальной ткани с отношением эмиссии флуоресценции одАТ к аутофлуоресценции ткани при двухфотонном возбуждении более чем в 40 раз выше, чем при однофотонном возбуждении. Полученные данные показывают, что в качестве меток конъюгаты одАТ-КТ обладают таким же или даже лучшим качеством, чем "золотой стандарт" иммуногистохимической диагностики. Разработанные нанозонды должны найти широкое применение в высокоэффективной визуализации опухоли и многопараметрической диагностике.