Войти / Регистрация
Корзина

  • Ваша корзина пуста
Войти / Регистрация
Корзина

  • Ваша корзина пуста

Статья «Сигнальная пептидаза Escherichia coli способна узнавать и расщеплять сигнальную аминокислотную последовательность рекомбинантной а-амилазы из Bacillus licheniformis, "Биохимия"»

Авторы:
  • Малик Б.
  • Рашид Н.
  • Ахмад Н.
  • Ахтар М.
стр. 1215-1221
Платно
  • В выпуске: №8, 2013, Том 78
  • В журнале: Биохимия
  • Издательство: ФГУП «Издательство «Наука»
  • Рубрика ГРНТИ: Химия. Биология. Медицина.
  • Год выхода: 2013
  • SDI: 007.001.0320-9725.2013.000.008.1215.1221
  • ISSN: 0320-9725
Ключевые слова:
  • а-амилаза
  • Bacillus licheniformis
  • а-amylase
  • Signal peptide
  • сигнальный пептид
Аннотация:
Ген а-амилазы из Bacillus licheniformis и его гомолог, не кодирующий сигнальную аминокислотную последовательность, были клонированы и экспрессированы в компетентных клетках Escherichia coli. Продуцируемые E. coli рекомбинантные белки располагались в цитоплазме клеток-продуцентов в виде нерастворимых, но ферментативно активных цитоплазматических агрегатов. Экспрессия при низкой концентрации индуктора (0,01 мМ изопропил P-D-тиогалактопиранозид вместо 0,5 мМ) и при пониженной температуре (18° вместо 37°) приводила к продукции значительных количеств растворимого рекомбинантного фермента, находящегося в растворимом состоянии и расположенного во внеклеточной среде. Рекомбинантный белок, несущий сигнальную последовательность, в отличие от своего гомолога, не содержащего этой аминокислотной последовательности, мог экспортироваться из клеток-продуцентов во внешнюю среду. При этом, активность а-амилазы в культуральной среде нарастала постепенно во времени с начала индукции экспрессии. Методом масс-спектрометрии (MALDI-TOF MS), а также путем определения N-концевой последовательности очищенной рекомбинантной а-амилазы было установлено, что сигнальная пептидаза E. coli расщепляет сигнальную последовательность между остатками Ala28 и Ala29 фермента-предшественника. Предполагается, что сигнальный пептид а-амилазы из B. licheniformis можно использовать для секреции различных рекомбинантных белков, которые экспрессируются и продуцируются с помощью E. coli.

Архивные статьи (2015 год и ранее) доступны для ознакомления бесплатно, для скачивания их необходимо приобрести. Для просмотра материалов необходимо зарегистрироваться и авторизоваться на сайте.

Чтобы приобрести доступ к материалу для юридического лица, пожалуйста, свяжитесь с администрацией портала с помощью формы обратной связи либо по электронному адресу libnauka@naukaran.com.  

Действия с материалами доступны только авторизованным пользователям.