Статья «ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ВЫЯВЛЕНИЕ ИНТЕГРАЦИИ мтДНК В ЯДЕРНОМ ГЕНОМЕ, ИНДУЦИРОВАННОЙ ИОНИЗИРУЮЩЕЙ РАДИАЦИЕЙ, "Радиационная биология. Радиоэкология"»

Перенос мтДНК в ядерный геном принято рассматривать как постоянный и динамичный процесс, формирующий numt-псевдогены или numt-вставки. Их можно рассматривать не только как нейтральный полиморфизм; они могут быть сопряжены с онкогенезом, старением и генетическими заболеваниями. Экспериментальное выявление numt-вставок, возникающих de novo, ограничивается из-за наличия многочисленных гомологий мтДНК, конститутивно существующих в ядерных геномах эукариот. Известно, что яДНК курицы конститутивно содержит 12 numt-псевдогенов. Предпринята попытка экспериментально выявить возникновение de novo numt-вставок в ядерной ДНК (яДНК) эмбрионов кур (Gallus gallus), изъятых из яиц, облученных рентгеновскими лучами. Образцы яДНК печени эмбрионов были очищены от свободной мтДНК двукратным гель-электрофорезом. Для выявления numt-вставок в яДНК контрольных и выживших эмбрионов (из облученных яиц) были проведены ПЦР с использованием 11 пар праймеров, фланкирующих участки мтДНК размером около 300?400 п.н. ПЦР с яДНК контрольной группы не выявило наличие в них гомологий мтДНК, амплифицируемые с подобранными праймерами. ПЦР с яДНК эмбрионов из облученных яиц показали, что в яДНК двух эмбрионов из восьми появились амплифицируемые сайты мтДНК. Стабильно выявляются ПЦР-амплификации трех локусов мтДНК в яДНК от одного эмбриона и четырех локусов в яДНК от другого эмбриона. Секвенирование ПЦР-ампликонов, синтезированных на матрицах этих яДНК, показали, что их последовательности идентичны мтДНК и точно охватывают сайты нескольких генов и участок D-loop мтДНК. Таким образом, результаты эксперимента указывает, что ионизирующее излучение может индуцировать интеграцию фрагментов мтДНК в ядерный геном, по-видимому, в процессе репарации двунитевых разрывов яДНК посредством механизма негомологичного связывания концов.