Войти / Регистрация
Корзина

  • Ваша корзина пуста
Войти / Регистрация
Корзина

  • Ваша корзина пуста

Статья «ПОЛУЧЕНИЕ ЕДИНЫМ МЕТОДОМ ДНК-СОДЕРЖАЩИХ ЧЕХЛОВ ИЗ ВЕГЕТАТИВНЫХ И ПОКОЯЩИХСЯ КЛЕТОК БАКТЕРИЙ ДЛЯ ИХ ЭФФЕКТИВНОЙ ДЕТЕКЦИИ В ПЦР, "Микробиология"»

Авторы:
  • Мулюкин А.Л.1
  • Сузина Н.Е.2
  • Эль-Регистан Г.И.3
  • Данилевич В.Н.4
стр. 300-
Платно
1 Институт микробиологии им. С.Н. Виноградского РАН, Москва, 2 Институт биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г.К. Скрябина РАН, 142290 г. Пущино, Московская обл., проспект Науки, 5, 3 Институт микробиологии им. С.Н. Виноградского Российской академии наук, Москва, 4 Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, Москва,
  • В выпуске: №3, 2013, Том 82
  • В журнале: Микробиология
  • Издательство: ФГУП «Издательство «Наука»
  • Рубрика ГРНТИ: Биологические науки
  • Год выхода: 2013
Аннотация:
Впервые для бактериальных клеток различного физиологического статуса (вегетативных, покоящихся форм разных типов и нежизнеспособных микромумий) был апробирован единый метод получения матриц для ПЦР в виде ДНК-содержащих клеточных чехлов с пермеабилизованными клеточными оболочками. Процедура получения ДНК-содержащих чехлов включала одностадийную (кипячение в буфере с солями-хаотропами) или двустадийную (кипячение в буфере с хаотропами с последующей обработкой протеиназой К) пробоподготовку клеток. Предложенный метод оказался эффективным для детекции не только вегетативных клеток, но и спор бацилл и цистоподобных покоящихся клеток (ЦПК) неспорообразующих бактерий. Например, при двустадийной пробоподготовке спор <i>Bacillus cereus</i> чувствительность ПЦР повышалась до уровня обнаружения 3?30 спор в пробе, а при одностадийной пробоподготовке ? оказалась на три порядка меньше и составила 10<sup>4</sup> спор в пробе. Повышение чувствительности ПЦР-детекции (в 4?10 раз) за счет применения двустадийной проподготовки было показано для ЦПК бацилл, стафилококков и микобактерий. Аналогичным образом была продемонстрирована возможность ПЦР-детекции микромумий стафилококков, необратимо утративших жизнеспособность и потому не выявляемых методами посевов. Применение единого метода пробоподготовки, обеспечивающего эффективную детекцию в ПЦР бактериальных клеток, вне зависимости от их физиологического состояния, представляется перспективным для более полного выявления микробного разнообразия и общей обсемененности природных субстратов.

Архивные статьи (2015 год и ранее) доступны для ознакомления бесплатно, для скачивания их необходимо приобрести. Для просмотра материалов необходимо зарегистрироваться и авторизоваться на сайте.

Чтобы приобрести доступ к материалу для юридического лица, пожалуйста, свяжитесь с администрацией портала с помощью формы обратной связи либо по электронному адресу libnauka@naukaran.com.  

Действия с материалами доступны только авторизованным пользователям.