Статья «АГОНИСТ-СПЕЦИФИЧНОЕ УЧАСТИЕ SOC- И ARC-КАНАЛОВ И iPLA2 В РЕГУЛЯЦИИ ВХОДА Са2+ ПРИ КОЛЕБАТЕЛЬНЫХ ОТВЕТАХ В АДИПОЦИТАХ, "Биологические мембраны: Журнал мембранной и клеточной биологии"»

Активация входа Са²⁺ при стимуляции клеток агонистами может обеспечиваться различными механизмами, включая депо-управляемый вход Ca²⁺ (store-operated calcium entry, SOCE) и действие продуктов фосфолипазы A₂ (PLA₂). В связи с существованием в адипоцитах двух относительно независимых путей мобилизации Са²⁺ из внутриклеточных запасов, в данной работе мы изучили, сопряжены ли эти пути с индивидуальными механизмами входа Са²⁺ в клетку. Показано, что ацетилхолин (ACh) вызывает колебательные изменения концентрации Са²⁺ в цитозоле, не зависящие от ингибирования SOCE посредством YM-58483 или 2-APB. Эти колебания устранялись при добавлении La³⁺, который ингибирует как депо-управляемые Ca²⁺-каналы, так и ARC-каналы (регулируемые арахидоновой кислотой, АА). Ответы на ACh подавлялись AACOCF₃, ингибирующим PLA₂ типов IV и VIA (iPLA₂). Колебания под действием эмбриональной коровьей сыворотки (FBS), отличавшиеся достижением базального уровня между спайками, напротив, прекращались в присутствии YM-58483 или La³⁺, но не зависели от AACOCF₃. Одна и та же клетка могла отвечать на ACh и FBS при их последовательном добавлении в любом порядке с промежуточной отмывкой. Подобные по форме колебательные ответы (от базального или повышенного уровня) на фенилэфрин постепенно затухали после ингибирования фосфолипазы C или рецептора инозитол-1,4,5-трисфосфата и частично ослаблялись ингибиторами YM-58483 или La³⁺ без существенного влияния AACOCF₃. АА в концентрации 1?10 мкМ вызывала колебания при добавлении как после спонтанного прекращения ACh-индуцированных колебаний, так и самостоятельно, причем после ACh отчетливый эффект достигался при меньших концентрациях АА. Ингибитор кальмодулина R24571 вызывал колебания, которые могли подавляться YM-58483 или AACOCF₃, что указывает на активацию, соответственно, SOCE и iPLA₂. В целом эти результаты показывают, что механизм активации входа Са²⁺ зависит от того, какой сигнальный путь затрагивается агонистом. Ацетилхолин не вовлекает SOCE, но активирует PLA₂ с вероятным участием формы VIA, что сопровождается действием ее продукта(-ов) на ARC-каналы и, возможно, на лизофосфолипид-активируемые каналы. FBS действует через SOCE без участия PLA₂. Эти два варианта могут сосуществовать в случае фенилэфрина.